1、灭菌,一般采用蒸气灭菌,可根据生产量的大小选用不同规格的锅炉,也可用铁桶改制成蒸气发生器。改制时在铁桶的一侧割开一个口,用直径为2厘米的钢管从开口处插入桶的另一侧,将开口与钢管接触处焊接严密。在开口的同一侧的不同位置开一个直径为4厘米的口,并用一根直径为4厘米的短钢管稍插入桶壁与开口焊接严密。直径为缺喊2厘米的管做加水管,直径为4厘芦脊米的管做排气管。用砖砌成灶,将桶坐在灶上,桶内加水后即可于灶内烧火,使蒸气产生,灭菌中间须经常加水以免将桶烧干影响蒸气的产生量。
2、接种,接种人员进入接种室后用75%的酒精棉球仔细擦洗双手一遍,然后每3人一组,一人从瓶内挖出菌种,两人解袋、扎袋。每袋两端接入红枣大小的菌种2~3块即可。一次要将所有菌袋全部接完,中间不可随意出入,否则需要重新熏蒸灭菌后才可再进行操作。
3、发菌管理,接菌后的菌袋放入干净的室内或大棚内避光培养,保持温度在25℃~28℃。前5天不要通风,棚内可利用增光或遮光的方法增降温度,增光时袋堆要用黑薄膜或草苫遮光。5天后适量通风,保持湿度在70%以下。经过40~50天的培养,菌丝发满袋后可转入出耳管理。
4、出耳管理
①场地管理。如果出耳场地选择在棚内,可在棚内做15厘米宽、15~20厘米高的小土埂,土埂间距80厘米。在室外也可以按这种方法做土埂,如在硬化的地面上可按上述距离铺一层砖即可。
②菌袋开口。准备好场地后,就可以对菌袋割出耳口。先伏哗野将菌袋用1%的高锰酸钾溶液或0.2%的克霉灵溶液清洗消毒,然后用锋利的刀片在菌袋两端分别划开4~6个“v”形口,口的上部直径为2厘米左右。
③菌袋摆放。划口后将菌袋平放于土埂上,袋与袋间距5~8厘米,中间用土填实。如系硬化地面,也可不填土。填土的要在袋的上部加上2~3厘米厚的土层,然后按第一层摆法摆好第二层菌袋。不填土的要在第一层袋上摆上两根直径为2~3厘米的小竹竿,然后放第二层菌袋。这样,依次摆放6~8层。最后在土堆近处铺设一层地膜,以防止喷水时土粒溅到耳片上。
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