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凝血酶时间测定试剂盒（凝固法）
使用说明书
产品名称
1.通用名称：凝血酶时间测定试剂盒
2.英文名称：TT
包装规格
10×2ml，10×4ml，5×2ml，10×10ml
预期用途
本试剂盒用于检测人友雹搜血浆的凝血酶时间。
该产品可辅助用于高分子量肝素的监控好历治疗以及纤维蛋白溶解治疗监控，初步筛选纤维蛋白原机能不良及一些严重的纤维蛋白原缺乏病症，可粗略用于检测干素抗凝的治疗。
（1）TT延长的临床意义：超过正常对照3s以上为TT延长：①纤维增肆销多或肝素抗凝物质存在以及AT-III显著提高；②纤维蛋白原降解物的增加；③纤维蛋白原减少；④纤维蛋白原机能障碍；⑤纤维蛋白原分子异常。
（2）TT缩短的临床意义：①高FIB血症；②钙离子存在时或标本有微小凝结块及PH呈酸性。
检验原理
适量的凝血酶将血浆样品中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白，从而使血浆凝固。凝固所需的时间即为凝血酶时间（TT）。
主要组成成份
凝血酶 28.5IU/ml
Hepes缓冲液 60mM
储存条件及有效期
2-8℃可保存12个月，未开封试剂有效期内稳定。开封复溶后37℃下试剂可稳定7天。
适用仪器
适用于SYSMEX CA-50半自动血凝仪，SYSMEX CA-1500全自动血凝仪， STAGO COMPACT全自动血凝仪。
样本要求
新鲜静脉血与0.109M的柠檬酸钠按9:1混合均匀，以3000rpm离心15分钟（建议使用低温离心机），收集上层液体（血浆），在2小时内进行实验。如果样品2小时内不能检测，血浆应冻存。-20℃以下冷冻保存两周，-70℃以下冷冻可保存一个月。冻存的样品检测前必须37℃迅速解冻，不可反复冻融。
zhū jiàng gài sù
猪降钙素是一种单链肽激素，其由甲状腺滤泡旁细胞合成和分泌，主要由肾脏代谢。它可降低血浆中钙、磷浓度，抑制钙、磷的吸收，是甲状旁腺激素的拮抗物。其生物活性主要作用的靶器官为骨、肾。通常钙水平的升高和降低标志猪降钙素的分泌情况，循环中钙水平升高，则猪降钙素水平也迅速升高。测定猪降钙素临床意义主要在于监测疗效和癌症复发。在全部甲状腺切除后，猪降钙素水平持续升高则说明有残余的肿瘤组织形成。
人猪降钙素的化学结构
低血钙素，降血钙素，降钙素
猪降钙素
激素类测定 > 甲状旁腺激素测定
本实验是一种系列竞争反应放射免疫分析法，病人样本和抗猪降钙素抗体首先要经过预先温育，标记猪降钙素和病人样本中猪降钙素同时竞争抗 *** 点。温育一定时间后，用PEG第二抗体来获得沉淀结合物。最后，抗体结合物沉淀后进行计数，则病人样本的浓度从标准曲线上就能得到。
（1）猪降钙素抗血清：一瓶（二瓶*）冻干粉猪降钙素抗血清。每瓶加10ml蒸馏水溶解，轻轻翻转混匀。冷存：溶解后在2～8℃可稳定至少3天。
（2）[125I]猪降钙素：一瓶（二瓶*）冻干粉碘标记猪降钙素。每瓶加10ml蒸馏水溶解，轻轻翻转混匀。冷存：溶解后在2～8℃可稳定至少30天，或至瓶上所标明的失效期。
（3）猪降钙素标准品：六瓶标号A至F的冻干粉标准品。提前至少30min重新溶解，零标准品A瓶加6.0ml蒸馏水，其余标准品B至F瓶各加3.0ml蒸馏水。使用移液管并轻轻翻转混匀。冷存：溶解后在2～8℃可稳定至少30天，冻存可延长标准品的有效期。如有必要，可分瓶避免反复冻融。
每批标准品的猪降钙素浓度大约为0、30、100、300、600、和1200ng/L。准确浓度可参见瓶上的标签。其它标准品点可通过以合适比例混合给出的标准品而得到（表1）。
（4）沉淀溶液：一瓶（二瓶*）沉淀溶液。内含驴抗羊丙球蛋白（DAGGG）和低浓度聚乙二醇。沉淀溶液以液体形式被提供、备用。陪敏喊冷存：开盖后在2～8℃可稳定至少30天。在冷存后，可能形成细小芦野的沉淀物，因而在使用前，应充分混匀沉淀溶液。
（5）猪降钙素质控：二瓶，标号1和2。内含降猪降钙素和蛋白基质溶液。提前至少30min，用移液管准确加入2.0ml蒸馏水溶解，轻轻地旋转或翻转混匀。冷存：溶解后在2～8℃可稳定至少30天。
*指200管KCLD2。
除沉淀溶液外所有组分在使用前一定要处于室温状态。
（1）成对标号16支试管：T（总计数），NSB（非特异结合），A（最大结合）和B至F。成对标号其它试管用于血清样本和质控的检测。
（2）向NSB和A试管中，加入200μl零标准品A。向B至F管中，加入200μl相应的标准品。向其它准备好的试管中，加入200μl相应的病人血清及质控。
注意：高值病人血清在使用前用试剂盒中的零标准品稀释。
（3）向除了NSB和T管外的所有试管中加入100μl猪降钙素抗血清（红色）。振荡。
（4）在室温温育3h。
（5）向所有试管中，加入100μl标记物（黄色）。振荡。
注意：取出T管待计数。
（6）在0～4℃温育18h。
注意：温育时间在16～22h之间是合适的。
（7）向所有试管中，加入1.0ml冷沉淀溶液（蓝色）。振荡。
（8）室温温育30min。
（9）3000×g离心15min。
（10）使用泡沫倾倒架，倾去上清液，保留沉淀物待计数。
注意：倒置试管于吸水纸上10min，然后轻轻叩击试管，吸干管壁除去残余的液珠。
（11）每管计数1min。
男性：0～14ng/L
女性：0～28ng/L
甲状腺髓样癌 >100ng/L
升高：见于甲状腺癌、小细胞肺癌、乳腺癌。尤其是当肿瘤发生骨转移的患者，血液猪降钙素含量绝大多数均升高，而且猪降钙素可反映癌肿范围的大小。另外，肾功能衰竭、孕妇、白血病亦可升高。
离体后血液标本中的猪降钙素即被逐渐降解，标本收集后应立即冷冻，以免造成测定结果偏低。
甲状腺癌、肺癌、乳腺癌
猪降钙素的主要作用是降低血钙和血磷，其主要靶器官是骨，对肾也有一定的作用。
猪降钙素抑制破骨细胞活动，减弱溶骨过程，这一反应发生很快，大剂量的猪降钙素在15min内便可使破骨细胞活动减弱70%。在给猪降钙素1h左右，出现成骨细胞活动增强，持续几天之久。这样，猪降钙素减弱溶骨过程，增强成骨过程，使骨组织释放的钙磷减少，钙磷沉积增加，因而血钙与血磷含量下降。
成人猪降钙素对血钙的调节作用较小，因为猪降钙素引起的血钙浓度下降，可强烈地 *** PTH的。PTH的作用完全可以超过猪降钙素的效应。另外，成人的破骨细胞每天只能向细胞外液提供0.8g钙，因此，抑制破骨细胞的活动对血钙的影响是很小的。然而，儿童骨的更新速度很快，破骨细胞活动每天可向细胞外液提供5g以上的钙，相当于细胞外液总钙量的510倍，因此，猪降钙素对儿童血钙的调节则十分明显。
猪降钙素能抑制肾小管对钙、磷、钠及氯的重吸收，使这些离子从尿中排出增多。
猪降钙素的分泌主要受血钙浓度的调节。当血钙浓度升高时，猪降钙素的分泌亦随之增加，猪降钙素与PTH对血钙的作用相反，区同调节血钙浓度的相对稳定。比较猪降钙素与PTH对血钙的调节作用，有两个主要的差别：
①猪降钙素分泌启动较快，在1h内即可达到高峰，而PTH分泌则需几个小时；
②猪降钙素只对血钙水平产生短期调节作用，其作用很快被有力的PTH作用所克服，后者对血钙浓度发挥长期调节作用，由于猪降钙素的作用快速而短暂，所以，对高钙饮食引起的血钙升高回复到正常水平起着重要作用。进食可 *** 猪降钙素的分泌。这可能与几种胃肠激素如胃泌素、促胰液素以及胰高血糖素的分泌有关，它们都有促进猪降钙素分泌的作用，其中以胃泌素的作用最强。
现将PTH，1,25（OH）2D3和猪降钙素对血钙的调节作用及其相互关系总结于图2224。
图2224 PTH、CT与1,25（OH）2D3对血钙的调节
→表示促进→表示抑制
猪降钙素
Calcitonin
密钙息；利钙灵；鲑猪降钙素；合成鲑猪降钙素；低血钙素，降血钙素，降钙素
内分泌系统药物 > 甲状旁腺及骨代谢疾病用药物
1.针剂猪降钙素：50U（1ml），100U（1ml）；
2.鼻腔喷雾剂：每揿50U。
1.体外骨培养证明，猪降钙素既能抑制骨的吸收，又能抑制骨自溶作用，使骨骼释放钙减少，同时骨骼不断摄取血浆中的钙，导致血钙降低。猪降钙素还可抑制骨盐的溶解与转移，抑制骨基质分解，提高骨的更新率，增加尿钙、尿磷排泄，引起低钙血症或低磷血症。在体内的降低血钙作用很短暂，猪降钙素可对抗甲状旁腺激素对骨骼的作用。
2.对肾脏的作用：可抑制肾小管对钙、磷、钠的重吸收，从而增加它们在尿液中排泄，但对钾和氢则影响不大。
3.对胃肠道作用：可抑制肠道转运钙以及胃酸、胃泌素和胰岛素等的分泌。
口服猪降钙素后，在胃液内迅速降解；肌内或皮下注射后，猪降钙素的生物活性约为70%，血浆药物浓度达峰时间为1h。表观分布容积为0.15～0.3L/kg。血浆蛋白结合率为30%～40%，血浆半衰期为70～90min。主要在肾脏代谢，也在血中和外周组织中代谢，95%的药物及其代谢产物自肾脏由尿液中排出，其中原形药物为2%。
用于畸形性骨炎（有骨痛者、骨折而不易愈合、神经压迫症、因不活动而血钙过高及手术前后可以采用），老年人骨质疏松，高钙血症，也可用于抑制胃壁细胞分泌胃酸，对胃溃疡及十二指肠溃疡产生治疗作用。此外亦可用于高磷血症及早期诊断甲状腺髓样癌等。
高钙血高钙血症患者禁用。
1.有过敏史者应先用1:100猪降钙素稀释液做皮肤试验。
2.使用过程中过敏，如出现喘息、眩晕、耳鸣、便意等应立即停药。
3.孕妇及哺乳妇女禁用。
皮下、肌内注射或静脉滴注后的不良反应为脸部及手潮红，约见于20%～30%患者。常于注入后几分钟内发生，历时约1h。少数患者有寒意，偶见有腹泻，呕吐，尿意频繁。非人类猪降钙素可发生抗体和过敏性皮疹，尤以肌内注射者较多于皮下注入者，鲑鱼猪降钙素作用最强而应用最广，有57%发生抗体，23%因此发生耐药性。罕见人类猪降钙素抗体。
1.用于治疗变形性骨炎：每天20～50U，皮下注射或50～100U，每周2～3次，皮下注射，疗程6个月以上，可延长至12个月。如疗效不明显或有不活动性高钙血症与神经症状，反复骨折者可增大剂量至每天100U。
2.治疗急性高钙血症：剂量宜大，每天静脉滴注200～1000U，每天4～6次，一般仅于48h内见效，逾期无效。用于治疗骨质疏松症，剂量不定，一般每天20～50U。
（尚不明确）
PCT指的是降钙素原，降钙素锋弯原在临床的正常值参考范围，都是小于0.162的，单位是闭哗ng/mL。相应的正常范围之内，也有可能有一些分别，如接近于0.162/mL，那么也是有可能存在轿基行细菌感染的。
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